高效液相色谱—清洗关机及操作注意事项

2020年04月13日 标签:

1、分析完毕后,先关检测器和数据处理机,再用适当经滤过和脱气的溶剂清洗 色谱系统,正相柱一般用正已烷,反相柱如使用过分含盐流动相,则先用水洗,然后用甲醇-水冲洗,冲洗前先按6.1.1-6.1.2操作,再用分析流速冲洗,各种洗溶剂般冲洗15-30分钟,特殊情况应延长冲洗时间。

2、 冲洗完毕后,逐步降低流速至0,关泵,进样器也应用相应溶剂冲洗,可使 用进样阀所附专用冲洗接头。

3、关断电源,作好使用登记,内容包括日期、检品、色谱柱、流动相、柱压、 使用小时数、仪器完好状态等。

1、色谱柱与进样器及其出口端与检测器之间应无渗漏连接,以免试样扩散影响分离。

2、新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时,应将其出口端与检测器脱开,避免污染。

3、使用的流动相应与仪器原保存溶剂能互溶,如不互溶,则先取下上次的色谱柱,照6.1.1-6.1.2的方法用异丙醇冲洗过渡,过渡完毕后,接上相应的色谱柱,换上本次使用的流动相,再按6.1.1顺序操作。

4、压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析,应检查泵中气泡是否已排除,各连接处有无漏液,排除故障后方能进行操作。如压力升高,甚至自动停泵,应检查柱端有无污染堵塞,可小心卸开柱的进口端螺帽,挖出被污染填冲剂后,补入同类填充剂,仔细安装好,再进行操作。

5、发现记录基线波动,出现毛刺等现象,首先应检查检测器流通池中是否有气泡或污染,如不是流通池引起,可等待氘灯稳定,同时检查仪器的接地是否良好,必要时换上新的氘灯。仪器稳定后方能进行操作。

6、进样前,色谱柱应用流动相充分冲洗平衡,如系统适用性并不符合规定,或填充剂已损坏,则应更换新的同类色谱柱进行分析,由于同类填充剂的化学键合相的键合度及性能等存在一定差异,往往依法操作达不到预定的分离时,可更换另一牌号的同类色谱柱进行试验。

7、以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流动相pH值的影响,使用时,应详细参阅说明书,在规定的pH值范围内选用流动相,一般pH范围为(2.57.5)。使用高pH值流动相时,可在泵与进样器之间连接-硅胶短柱,以饱和流动相保护分析柱,并尽可能缩短在高pH值下的使用时间,用后立即冲洗。

8、各色谱柱的使用应登记,以方便选择和更新。

9、色谱流路系统,从泵、进样器、色谱柱到检测器流通池,在分析完毕后,均应按5.1充分冲洗,特别是用过含盐流动相的,更注意先用水,再用甲醇一水,充分冲洗。如发现泵漏液等较严重的情况,应请有经验的维修人员进行检查、维修。